細(xì)胞培養(yǎng)中的常見(jiàn)污染類(lèi)型

凡是混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都可視為污染。細(xì)胞污染可分為三大類(lèi)：微生物污染、細(xì)胞間交互污染和化學(xué)污染。

微生物污染：包括真菌、細(xì)菌、支原體和病毒污染。

細(xì)胞間交互污染：指的是非同種的其他細(xì)胞污染

化學(xué)污染：指影響細(xì)胞生存的非細(xì)胞所需的化學(xué)成分。

一、微生物污染

細(xì)菌和真菌污染是較容易發(fā)現(xiàn)的，而病毒、支原體和其他細(xì)胞系的污染是不容易被察覺(jué)的。

1. 細(xì)菌污染時(shí)培養(yǎng)液pH值改變，溶液變渾濁。細(xì)菌的大量增殖導(dǎo)致細(xì)胞液中營(yíng)養(yǎng)大量消耗，并產(chǎn)生毒素抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)，終導(dǎo)致細(xì)胞崩解死亡。在有抗生素存在的條件下易造成隱性污染。

2. 病毒污染是難發(fā)現(xiàn)和清除的，對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員也是一個(gè)潛在的危險(xiǎn)因素，不過(guò)病毒具有嚴(yán)格的宿主性和自限性。

3. 支原體污染是一種比較嚴(yán)重的細(xì)胞污染，難發(fā)現(xiàn)難去除。該種污染在顯微鏡下看不到，不引起培養(yǎng)液渾濁和pH改變。由于支原體營(yíng)養(yǎng)要求高，故不容易用傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)法檢測(cè)到。此外，支原體不能通過(guò)過(guò)濾清除，且大多數(shù)抗生素對(duì)其無(wú)效！

4. 真菌污染中多是毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等污染，易通過(guò)孢子傳播。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成肉眼可見(jiàn)的白色或淺黃色漂浮物，短期內(nèi)培養(yǎng)液不渾濁。顯微鏡下觀察可見(jiàn)在細(xì)胞之間有縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀、管狀及樹(shù)狀菌絲。常規(guī)的抗生素、紫外線(xiàn)和酒精對(duì)真菌的滅菌效果較差，難以消除。真菌污染大部分是人為帶進(jìn)細(xì)胞間，或者空氣環(huán)境造成。

二、細(xì)胞系交叉污染

細(xì)胞系交叉污染難于發(fā)現(xiàn)，當(dāng)傳代細(xì)胞出現(xiàn)生長(zhǎng)速度異常時(shí)，可懷疑該種污染。預(yù)防該類(lèi)型污染時(shí)，操作人員應(yīng)同一時(shí)間只傳一種細(xì)胞，每種細(xì)胞液要有單獨(dú)的培養(yǎng)液，并且建立細(xì)胞庫(kù)，每三個(gè)月更換一次細(xì)胞。